При поддержке |  


Способ приготовления концентрата тромбоцитов

 

Кровь отбирают у коров на 40-й день после отела, так как в этот период в системе кровообращения количество тромбоцитов выше по сравнению с другими периодами. Коровы-доноры должны быть здоровыми, без инфекционных заболеваний и медикаментозного лечения в течение предыдущих двух месяцев. Тромбоциты выделяют методом двойного центрифугирования по следующей процедуре.

После хирургической обработки места пункции вокруг молочной или яремной вены отбирают 450 мл крови в специальные контейнеры (Terumo) с антикоагулянтом (ЦФДА-1). Контейнеры с кровью транспортируют в лабораторию при температуре +4 °C в течение не более 2 часов и сразу осуществляют выделение тромбоцитов.

Все операции сепарирования проводят в асептических условиях. Для приготовления тромбоцитов используют пробирки Falcon по 50 мл. Содержимое пробирок центрифугируют в течение 30 мин. при максимальной центробежной силе 100xg. В результате кровь разделяется на три составляющие: эритроциты (нижний слой), лейкоцитарную пленку (средний слой) и обогащенную тромбоцитами плазму (верхний слой).

После отделяют слой плазмы в новые пробирки (50 мл) и осуществляют повторное центрифугирование при 1500xg в течение 10 мин. В результате получают осадок тромбоцитов и бедную на тромбоциты плазму. Далее 2/3 верхнего слоя плазмы забирают путем аспирации. Осадок смешивают с остатком плазмы. Концентрацию тромбоцитов доводят до стандартного уровня — 1×109 тромбоцитов/мл.

Полученный концентрат фасуют в шприцы на дозы по 10 мл. Для активации тромбоцитарных факторов осуществляют три цикла замораживания при -80 °C и размораживание до 37 °C. Шприцы с дозами тромбоцитов сохраняют замороженными при -20 °C до использования.

Конвертационная таблица параметров центрифугирования, оборотов в минуту (об./мин.) до центробежной силы (xg)

Скорость, об./мин.

Радиус ротора (от центра ротора до образца), см

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

1000

45

56

67

78

89

101

112

123

134

145

157

168xg

1500

101

126

151

176

201

226

252

277

302

327

352

377xg

2000

179

224

268

313

358

402

447

492

537

581

626

671xg

2500

280

349

419

489

559

629

699

769

839

908

978

1048xg

3000

402

503

604

704

805

906

1006

1107

1207

1308

1409

1509xg

3500

548

685

822

959

1096

1233

1370

1507

1643

1780

1917

2054xg

4000

716

894

1073

1252

1431

1610

1789

1968

2147

2325

2504

2683xg

4500

906

1132

1358

1585

1811

2038

2264

2490

2717

2943

3170

3396xg

5000

1118

1398

1677

1957

2236

2516

2795

3075

3354

3634

3913

4193xg

Последние добавленные

18 янв. 2022 г., 14:00:00

ЧОСП «Нападовское»

24 нояб. 2021 г., 9:00:00

ЧСП «Украина» (ГК «Эридон»)

18 нояб. 2021 г., 13:30:00

ООО «Агрофирма им. Шевченко»

17 нояб. 2021 г., 16:10:00

Справка. Об инсектицидной обработке люцерны

17 нояб. 2021 г., 16:00:00

О лабораторном сходстве люцерны

17 нояб. 2021 г., 15:05:00

Справка. О массе тысячи зерен люцерны

23 сент. 2021 г., 14:55:00

ООО «Проминь–Лан»

23 сент. 2021 г., 14:50:00

ООО «Агрофирма „Соняшник“»